Здесь Вы можете оставить свой номер телефона и оператор "Столица-Медикл" cвяжется с Вами
+7
 
 
 
 
В вашу корзину добавлен товар.
При заказе этой позиции Вам необходимо иметь рецепт на неё.

Товар поставляется под заказ, оператор свяжется с вами для уточнения условий доставки. Товара нет в наличии - время доставки может увеличится.

перейти в корзину   продолжить заказ перейти в корзину   продолжить заказ   не добавлять товар
Авторизация
Контакты
Телефоны
755-9395 (24 часа)
Адрес Аптеки
Москва, Нагатинская улица, 1 строение 44


Товары@Mail.ru
Главная страница /  Медицинские справочники /  Антинуклеарный фактор (АНФ, HEp-2) с определением типа свечения (в крови)

Антинуклеарный фактор (АНФ, HEp-2) с определением типа свечения (в крови)

Ключевые слова: СКВ   системная красная волчанка   аутоантитела   склеродермия   синдром шегрена  

|
Общие сведения

Антинуклеарные антитела (АНА,ANA, антиядерные антитела, антинуклеарный фактор-АНФ)- метод НИФ на линии клеток HEp-2 с определением тип свечения. - показатель аутоиммунных заболеваний соединительной ткани. АНА представляет собой группу аутоантител к белкам и другим компонентам (включая ДНК), находящимся в ядрах клеток. Основные показания к применению: исключение диагноза - системная красная волчанка (считается, что АНА появляются в 90% случаев СКВ, иными словами, отрицательный результат с вероятностью около 90% исключает диагноз СКВ), дифференциальная диагностика системных коллагенозов (системная красная волчанка, склеродермия, узелковый периартериит, дерматомиозит), хронический активный гепатит.

К настоящему времени описано более 200 разновидностей АНА, направленных против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, компонентов сплайсосомы, рибонуклеоротеинов, белков ядрышек и центромер. При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани. Под термином «антинуклеарный фактор» понимают тест для выявления антинуклеарных антител с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции.

Одним из способов выявления антинуклеарного фактора в крови (антинуклеарных антител) является метод непрямой иммунофлюоресценции путем нанесения сыворотки пациента на клетки тканей перевиваемой линии человеческих клеток HEp-2 (клетки эпителиальной карциномы гортани человека линии Hep-2, содержащие различные ядерные антигены), используя меченый конъюгат с человеческими антителами. В качестве субстратов могут применяться и другие человеческие клеточные линии, однако благодаря хорошей морфологии и удобству культивирования именно линий Нер-2 стала общепризнанным субстратом непрямой иммунофлюоресценции. Метод обнаружения АНФ был разработан Tan в 1982, применившим в качестве субстрата человеческую перевиваемую эпителиоидную клеточную линию HEp-2. Это клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани человека, представляет собой крупные полиплоидные неороговевающие плоские эпителиоциты, образующие монослой на стекле. Сыворотку больного инкубируются с тканевым субстратом, при этом антинуклеарные антитела из сыворотки больного (если они присутствуют) связываются с соответствующими ядерным антигенами. Места связывания аутоантител детектируются с помощью античеловеческой антисыворотки, меченной флюоресцеином. Результаты реакции оцениваются микроскопией с помощью люминисцентного микроскопа и визуальной оценки характера свечения связавшихся антител. Среди преимуществ HEp-2 (при сравнении с криосрезами тканей животных) можно отметить высокую частоту деления клеток, позволяющую выявлять антитела к антигенам, экспрессирующимся только при делении клетки, и отсутствие клеточного матрикса ткани, затрудняющего визуализацию специфического свечения при сравнении с гистологическими срезами. При некоторых заболеваниях, например СКВ, системной склеродермии (системный склероз), некоторых инфекциях, иммунная система пациентов воспринимает ядра (белки ядер) клеток собственных тканей, как чужие, и продуцирует к ним антитела (антинуклеарные антитела - AHA). При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани.

При интерпретации данных следует учитывать, что спектр AHA включает в себя большую группу аутоантител к ДНК, нуклеопротеидам, гистонам, ядерным рибонуклеопротеидам и другим компонентам ядра. Таким образом, тест направлен на обнаружение различных антител к компонентам ядра и цитоплазмы, которые впервые были обнаружены при СКВ. В дальнейшем диагностические критерии теста были расширены в связи с обнаружением данных антител и при других заболевания соединительной ткани.

В скрининговых тестах для определения суммарных АНА обычно используется набор следующих антигенов, являющихся основными маркерами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP/Sm, J01, центромере B.
Основные антигены, применяющиеся в современных наборах для выявления ядерных антител класса IgG представлены следующим набором:

  1. 1. SS-A (Ro) - ядерные рибонуклеопротеины, (полипептиды). Антитела на них обнаруживаются, чаще, при системной склеродермии (60 % случаев), синдроме Шегрена (до 70% случаев) и при СКВ (до 30% случаев). Считается, что если данные антитела обнаруживаются в крови у беременных, то это является показателем риска увеличения возникновения неонатального волчаночноподобного синдрома у новорожденного ребенка (неонатальный люпус-синдром). Данные антитела матери проходят через плаценту и вызывают поражение плода, приводящие к гемолитической анемии и тромбоцитопении. К тяжелым последствиям относят поражение проводящей системы сердца ребенка (вплоть до постоянной кардиостимуляции). Отмечено, что у женщин у которых во время беременности был выявлен значительный титр данных антител, без явных клинических признаков, в дальнейшем развивается какое либо аутоиммунное заболевание, включая СКВ.
  2. 2. SS-B (La) - ядерные белки. Антитела к ним выявляются до 60% случаев при синдроме Шегрена и в 15% случаев при СКВ.
  3. 3. Scl-70 - белок-фермент, участвующий в обмене нуклеиновых кислот (топоизомераза-1). Антитела на данный белок наиболее специфичны при системной склеродермии (до 70% случаев).
  4. 4. Двухцепочечная ДНК - нативная ДНК. Антитела к ДНК наиболее специфичны при СКВ (до 80% случаев) и практически не определяются при ревматоидном артрите и склеродермии.
  5. 5. RNP/Sm - Комплекс антигенов RNP/Sm состоит из U1-рибонуклеопротеидов: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; а также из Sm-полипептидов: SmA | , SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Антитела, образующиеся к этим антигенам наиболее специфичны для смешанных заболеваний соединительной ткани - т.е. при наличии симптомов склеродермии, ревматоидного артрита, СКВ, полимиозита (около 95% случаев) и в меньшей степени для СКВ (до 30% случаев).
  6. 6. Jo-1 - фермент - синтетаза аминоацилтранспортной РНК. Аутоантитела к данному белку являются диагностически значимыми при миозите (полимиозит/дерматомиозит).
  7. 7. CENP-B (Центромера) - для выявления Антицетромерных антител (Anti-Centromer B), с целью диагностики CREST-синдрома (данный синдром представляет собой совокупность кальциноза кожи, синдрома Рейно, нарушения моторики пищевода, склеродактилии, телеангиэктазии). CREST-синдром относится к варианту системной склеродермии (системный склероз). Данные антитела у больных свидетельствуют о благоприятном течении системной склеродермии и говорят о небольшом поражении внутренних органов.
  8. 8. Hep-2 клетки - клетки эпителиальной карциномы гортани человека линии Hep-2, содержащие много различных ядерных антигенов, включая антиген SS-A (Ro) и антигены центромеры. Антитела к Hep-2 обнаруживаются у больных с полимиозитом и дерматомиозитом до 90% случаев.
  9. 9. Митохондрии (PDC) - PDC - пируватдегидрогеназный комплекс. Большая группа антимитохондриальных антител представляют собой аутоантитела, которые образовались на ферменты пируватдегидрогеназного комплекса, располагающегося в митохондриях клеток и участвующего в окислительном декарбоксилировании пирувата.

Часто АНА обнаруживаются при билиарном циррозе печени.

AHA обычно не проникают в живые клетки и поэтому безвредны. Но иногда они образуют комплексы антиген-антитело, которые вызывают повреждение ткани (как, например, при СКВ поражение почек). В связи с вовлечением в патологический процесс многих органов диагностическое значение определения AHA невелико и результаты анализа лишь частично подтверждают клинические данные.

Помимо ревматических заболеваний, АНА обнаруживаются и при хроническом активном гепатите до 50% случаев. Появление (низкие титры) возможно при воспалительных заболеваниях, онкологии и вирусных инфекциях.

  • Сравнительная частота выявления антинуклеарных антител.

     

    Заболевание и состояние Частота выявления, %
    СКВ

     

    95-100

     

    Люпоидный гепатит (новое название - хронический аутоиммунный гепатит)

     

    70 -80%

     

    Синдром Фелти (Felty. 1924 г.) - ревматоидный артрит + спленомегалия + нейтропения + лейкопения + лимфоаденопатия.

     

    95-100

     

    Системная склеродермия

     

    75-80

     

    Лекарственный волчаночныи синдром (гидралазин, прокаинамид, изониазид)

     

    Около 50

     

    Синдром Шегрена (Аутоиммунное системное поражение соединительной ткани. Характеризуется вовлечением в патологический процесс желез внешней секреции, главным образом слюнных и слезных, и хроническим прогрессирующим течением ).

     

    40-75

     

    Клинически здоровые родственники пациента с СКВ

     

    Около 25

     

    Дискоидная красная волчанка

     

    15-50

     

    Хронический ювенильный артрит, ревматоидный артрит

     

    15-30

     

    Узелковый периартериит

     

    15-25

     

    Дерматомиозит и полимиозит

     

    10-30

     

    Ревматизм

     

    Около 5

     

    Синдром Рейно

     

    15-20

     


     

     
 
|
Процедуры
  • После венепункции набирают кровь в пустую пробирку или с разделительным гелем.
  • Место венепункции придавливают ватным шариком до остановки кровотечения.
  • При образовании гематомы в месте венепункции назначают согревающие компрессы.
 
|
Референтные значения
Титр менее 1:160
 
|
Цель исследования
Дифференциальная диагностика системных/ревматоидных заболеваний.
 
|
Отклонения от нормы

Отрицательный результат с вероятностью до 90% исключает диагноз - системная красная волчанка (СКВ), а также синдром Шегрена, диффузную склеродермию, вторичный антифосфолиподный синдром, смешанное заболевание соединительной ткани, CREST-синдром, олигоартикулярную форму ювенильного ревматоидного артрита. С вероятностью до 80% отсутствие АНФ исключает аутоиммунный гепатит 1 типа, первичный билиарный цирроз.
Следует учитывать, что антинуклеарный фактор может быть отрицательным у единичных больных с СКВ, антифосфолипидным синдромом, полимиозитом. В этих случаях необходимы дополнительные обследования.

По характеру флюоресценции ядер (люминисцентная микроскопия в реакции НИФ - непрямой иммунофлуоресценции) можно установить природу иммунного заболевания. Использование клеток линии НЕр-2 позволяет охарактеризовать более 20 различных вариантов окрашивания ядра, которые зависят от спектра антител, присутствующих в исследуемой сыворотке ( гомогенный, крупногранулярный, мелкогранулярный, митохондриальный, перефирический, точки в ядре, центромерный, цитоплазматический, ядрышковый). Периферическая (разновидность гомогенного сечения) флюоресценция характерна для СКВ, так как свидетельствует о присутствии анти-ДНК-антител. К основным антигенам при этом типе свечения являются - ДНК и гистоновые белки. Гомогенная, или диффузная, флюоресценция также характерна для СКВ с поражением почек, и сходных с ней заболеваний соединительной ткани, нефрите, лекарственно-индуцированной СКВ, системных и локализованных формах склеродермии. Антигенами при диффузном типе являются - нуклеосомы, дсДНК и гистонаны. Флюоресценция нуклеол (ядрышковое) наблюдается при системной склеродермии. Ядрышковый тип флюоресценции определяется у больных при наличии антител к компонентам ядрышка - PHК полимераза 1, NOR, U3RNP, PM/Scl. Цитоплазматический тип свечения указывает на антитела к тРНК–синтетазам, в частности Jo-1, и характерен при полимиозите. Гранулярный (крапчатый,пятнистый) характер флюоресценции отмечается при инфекционном мононуклеозе и смешанном заболевании соединительной ткани ((MCTD, Sharp-синдром), синдроме Шегрена, лекарственном волчаночном синдроме. К основным антигенам, антитела к которым приводят к появлению гранулярного типа свечения, относят Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B и PCNA. Крупногранулярный тип свечения отмечается при смешанном заболевании соединительной ткани и скорее всего заключается в присутствии RNP антигена. Мелкогранулярный тип (антитела против рибонуклеиновых белков - SS-A, SS-B и др) - при СКВ, кожных формах красной волчанки, склеродермии, синдроме Шегрена, ревматоидном артрите, полимиозите. Центромерный тип встречается при склеродермии. При взятии одной пробы крови, особенно у пациентов с диффузными заболеваниями соединительной ткани, в сыворотке могут обнаруживаться антитела к различным участкам клеточных ядер. Точки в ядре встречаются при аутоиммунных заболеваниях печени. Возможно сочетание нескольких типов свечения, например мелкогранулярного и ядрышкового, что характерно для антител к Scl-70. Кроме того, по мере увеличения разведения сыворотки характер флюоресценции может меняться, так как различные антитела проявляют активность при разных титрах.

 
Антинуклеарные антитела (АНА) (в крови)
Антинуклеарные антитела (АНА)(колич.) (в крови)
Антистрептолизин О (в крови) (АСЛО, ASLO)
Антитела к 2-спиральной ДНК (колич.) (в крови)
Антитела к 2-спиральной ДНК (титр) (в крови)
Антитела к кардиолипину IgA, IgM, IgG (в крови)
Антитела к одноцепочечной ДНК (АутоАТ к ден. (ss) ДНК)
Антитела к фосфатидилсерину
Антитела к фосфолипидам IgG (в крови)
Антитела к фосфолипидам IgM (в крови)
 
Позиций на странице: Все 10 25 50
Страницы: 1 2